冷凍外泌體與乾粉外泌體:保存技術的全面比較

選擇適合的外泌體保存技術:基於需求的最佳策略
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2024年12月31日 上午 2:24

幹細胞、外泌體與超泌體

冷凍外泌體與乾粉外泌體:保存技術的全面比較

外泌體保存的重要性

外泌體是一種奈米級胞外囊泡,具有卓越的細胞間訊息傳遞功能及顯著的生物活性。這些特性使其在臨床醫學與生物製藥領域中扮演重要角色。如何有效保存外泌體以維持其功能性,對於擴展其應用範圍至關重要。目前,主要有兩種外泌體保存方式:冷凍外泌體乾粉外泌體,兩者依據應用場景的不同,各有其獨特的優勢。

本文將針對冷凍外泌體與乾粉外泌體進行結構穩定性、生物活性、抗炎特性及應用場景的比較,幫助研究者與臨床醫師選擇最適合的保存方式。

了解外泌體保存:為何如此重要?

保存方式會直接影響外泌體的品質、穩定性及實際應用效果。高效的保存能確保外泌體維持結構與功能完整性,這對於成功的治療應用及藥物遞送至關重要。

保存技術需防止環境因素(如溫度、濕度及氧化)的破壞。冷凍與乾粉保存技術之所以廣受青睞,原因在於它們分別在維持外泌體活性及保存期限上表現出色。冷凍外泌體著重於生物活性與結構穩定性,而乾粉外泌體則強調保存期限及物流便利性。

冷凍外泌體:高生物活性與結構穩定性的佼佼者

低溫保存下的結構完整性

冷凍外泌體通常儲存在 -80°C 的超低溫環境下,這有助於長期維持其結構完整性。研究顯示,冷凍保存的外泌體關鍵蛋白標記(如 CD63、CD81 和 CD9)在保存 12 個月後仍可維持超過 95% 的穩定性 (Farrukh et al., 2014)。這種高度穩定性可確保外泌體在細胞訊息傳遞與治療應用中的效果。

低溫保存有效減少外泌體聚集及融合的風險,這些問題在其他保存方式中更為普遍。因此,冷凍外泌體是需要高度結構精確性的應用(如靶向治療與再生醫學)的首選。

抗炎與抗氧化特性

冷凍外泌體具有顯著的抗炎能力。在一項小鼠模型研究中,冷凍外泌體成功抑制超過 60% 的促炎因子 TNF-α 和 IL-1β 的表達 (Pacienza et al., 2018)。此外,它們還能啟動抗氧化應激路徑,如 HO-1 與 Nrf2,從而減少組織損傷 (Shen et al., 2021)

這些特性使冷凍外泌體在治療涉及急性炎症的疾病(如自體免疫疾病、組織損傷及某些癌症)方面具有顯著優勢。

臨床應用

冷凍外泌體廣泛應用於研究與治療急性病症。例如,在急性腫瘤炎症模型中,冷凍外泌體顯著降低血清中促炎細胞因子 IL-6 和 TNF-α 的濃度(減少 40%-60%),有效減輕炎症並提高動物的存活率 (Vrkoslav et al., 2023)。這些結果凸顯了冷凍外泌體在個性化醫療及高需求治療中的潛力。

然而,對低溫保存基礎設施的依賴,可能限制其在資源有限環境中的實用性,進一步突顯替代保存方式的必要性。

乾粉外泌體:穩定性與全球應用的最佳選擇

長期儲存的優勢

乾粉外泌體是透過冷凍乾燥技術製備的,該技術在去除水分的同時保留外泌體的結構。與冷凍外泌體不同,乾粉外泌體可在室溫下穩定保存達 12 個月,且結構與功能完整性保持率超過 85% (Knight, 2023)

這一特性使乾粉外泌體成為需長期保存或運輸的應用場景中的理想選擇,特別是在缺乏冷鏈物流設施的地區。

抗炎活性

儘管乾粉外泌體的抗炎活性略低於冷凍外泌體,但它們在減少炎症方面依然有效。例如,乾粉外泌體可降低促炎細胞因子 TNF-α 和 IL-6 的表達達 40%-50%,主要是透過 HO-1 和 Nrf2 通路發揮作用 (Shen et al., 2021)。這種活性適合許多治療用途,如慢性炎症管理及非緊急醫療治療。

優化的藥物遞送效率

乾粉外泌體在藥物遞送應用中表現優越,其藥物負載效率達 60%,顯著高於冷凍外泌體。此外,乾粉外泌體可提升細胞藥物攝取率 30%-40%,降低藥物副作用,並提升治療效果 (Qazi et al., 2023)

這一優勢使乾粉外泌體在藥物開發中成為變革性技術,推動更有效及更具患者友善性的藥物配方。

冷凍與乾粉外泌體的關鍵比較

指標冷凍外泌體乾粉外泌體
儲存需求-80°C 冷凍保存室溫保存
結構穩定性12 個月穩定性 >95%12 個月穩定性 >85%
抗炎活性抑制促炎因子超過 60%抑制促炎因子達 40%-50%
藥物遞送效率中等高(負載效率 60%)
物流需要冷鏈基礎設施適合全球運輸與擴展
應用場景急性炎症、高活性需求長期保存、藥物遞送

如何選擇適合的保存方式?

適用於冷凍外泌體的情境

  • 高生物活性應用:適用於需要最高生物活性的治療,如免疫調節與再生療法。
  • 短期需求:適合即時治療應用。
  • 控制環境:適用於具有冷凍保存設施的研究及臨床環境

適用於乾粉外泌體的情境

  • 長期保存需求:適合需長期保存或延遲應用的研究項目。
  • 製藥應用:因其高效的藥物遞送效率,乾粉外泌體非常適合製藥用途。
  • 資源有限環境:適用於缺乏冷鏈基礎設施的地區

未來發展與研究方向

雖然冷凍與乾粉外泌體各有優勢,但仍存在改進空間。對於冷凍外泌體,降低冷凍保存成本與簡化基礎設施需求,將有助於其更廣泛的應用。另一方面,提升乾粉外泌體的生物活性,將使其更適合高需求治療。

新興技術(如先進冷凍乾燥技術及混合保存技術)有望結合兩種方法的優勢。研究機構與產業界的合作,對於推動這些創新至關重要。

結論:根據需求最佳化外泌體保存

冷凍外泌體乾粉外泌體的選擇取決於具體應用需求。冷凍外泌體在生物活性與結構穩定性方面表現卓越,適合高需求的臨床應用;乾粉外泌體則憑藉其便利性與可擴展性,在製藥與長期儲存中佔據優勢。

通過根據應用場景選擇保存方法,研究者與臨床醫師能最大化外泌體的潛力,推動這些強大囊泡在多樣領域中的應用。

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參考文獻:

1.Aqil, F., Munagala, R., Jeyabalan, J., & Gupta, R. (2014). Abstract 5407: Milk derived exosomes: Scalable source of biologically active drug delivery nanoparticles. Cancer Research, 74, 5407-5407. 

2.Pacienza, N., Lee, R., Bae, E., Kim, D., Liu, Q., Prockop, D., & Yannarelli, G. (2018). In Vitro Macrophage Assay Predicts the In Vivo Anti-inflammatory Potential of Exosomes from Human Mesenchymal Stromal Cells. Molecular Therapy. Methods & Clinical Development, 13, 67 - 76. 

3.Shen, K., Jia, Y., Wang, X., Zhang, J., Liu, K., Wang, J., Cai, W., Li, J., Li, S., Zhao, M., Wang, Y., & Hu, D. (2021). Exosomes from adipose-derived stem cells alleviate the inflammation and oxidative stress via regulating Nrf2/HO-1 axis in macrophages.. Free radical biology & medicine

4.Vrkoslav, V., Smeringaiova, I., Smorodinova, N., Svobodova, A., Strnad, Š., Jackson, C., Burkert, J., & Jirsova, K. (2023). Quantification of Analgesic and Anti-Inflammatory Lipid Mediators in Long-Term Cryopreserved and Freeze-Dried Preserved Human Amniotic Membrane. Bioengineering, 10. 

5.Knight, R. (2023). AnteAGE MDX Exosome Characterization and Functional Testing. MedLiber of Regenerative Medicine

6.Shen, K., Jia, Y., Wang, X., Zhang, J., Liu, K., Wang, J., Cai, W., Li, J., Li, S., Zhao, M., Wang, Y., & Hu, D. (2021). Exosomes from adipose-derived stem cells alleviate the inflammation and oxidative stress via regulating Nrf2/HO-1 axis in macrophages.. Free radical biology & medicine

7.Qazi, R., Sajid, Z., Zhao, C., Hussain, I., Iftikhar, F., Jameel, M., Rehman, F., & Mian, A. (2023). Lyophilization Based Isolation of Exosomes. International Journal of Molecular Sciences, 24. 

編者: [ 醫淬思AI Lab ]

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文章標籤

# 外泌體藥物遞送# 抗炎治療外泌體# 外泌體保存技術# 乾粉外泌體# 冷凍外泌體